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HPLC测定VC银翘片中连翘苷的含量

来源: 作者: 发布时间:2007-12-31
【摘要】  目的  建立VC银翘片中连翘苷的含量测定。方法  采用高效液相色谱法测定,用C18柱(4.0mm×250mm,5μm),以乙腈-水(25:75)为流动相,检测波长277nm。结果  连翘苷的线性范围为0.4~3.0μg;连翘苷平均回收率为99.28%,RSD=2.81%(n=5)。结论  所用方法测定样品灵敏度高,重复性好,能有效地控制VC银翘片的质量。

    【关键词】  VC银翘片;连翘苷;HPLC;含量测定

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     1  仪器与试药

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    仪器:Waters 600E液相色谱仪;Waters 600泵,Waters2997光电二极管矩阵检测器;Millennium32色谱工作站。FA1004天平(上海良平仪表有限公司),KQ3200超声清洗器(昆山市超声仪器有限公司) 。连翘苷(供含量测定用,中国药品生物制品检定所,批号:110821-200406)。 字串7

    试剂及试样: 乙腈为色谱纯,其余试剂均为分析纯,水为重蒸水,VC银翘片(自制)。

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    2  含量测定 字串1

    2.1  色谱条件[1]  色谱柱Symmetryshield(Rp18  4.6mm×250mm) ;乙腈-水(25:75)为流动相;检测波长277nm;流速1ml/min;柱温23℃。 字串9

    2.2  对照品溶液的制备  精密称取连翘苷对照品适量,加甲醇制成每1ml含0.2mg的溶液,摇匀,即得。 字串5

    2.3  样品供试液的制备  精密称取VC银翘片除去糖衣研细后的粉末3.500g,置居塞锥形瓶中,精密加入甲醇45ml,称定重量,浸渍过夜,超声处理25min,放冷至室温,再称定重量,补加甲醇至原重量。摇匀,滤过,弃去初滤液。精密量取续滤液15ml,蒸至近干,加中性氧化铝1.5g拌匀,加至中性氧化铝柱(100~120目,3g,内径1~1.5cm)上,用70%的乙醇240ml洗脱,收集洗脱液,浓缩至干,残渣用50%甲醇溶解,转移至15ml容量瓶中,并用50%甲醇稀释至刻度,摇匀,滤过,取续滤液为供试品溶液。

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    2.4  系统适用性试验  分别精密吸取对照品溶液, VC银翘片供试液,缺连翘的阴性样品供试液各10μl,注入HPLC仪,按上述色谱条件测定。

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    2.5  线性关系考察[2]  分别精密吸取对照品溶液2、3、5、10、15μl,按上述色谱条件,注入高效液相色谱仪,记录峰面积。以峰面积对进样量(μg)回归,得回归方程C= 1.5812×10-6-0.04196,相关系数r =0.9999,表明连翘苷在0.4~3.0μg之间线性关系良好。

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